Perfil proteolítico de extratos aquosos de folha e semente de Mucuna pruriens (L.) DC

Raquel Elisa Silva-López
OrcID
Nathalia N. M. Vidal
Nathalia M. N. Vidal
Rayane N. Gonçalves
Rayane N. Gonçalves

    Raquel Elisa Silva-López

    FIOCRUZ, Departamento de Química de Produtos Naturais, Farmanguinhos, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.

    OrcID http://orcid.org/0000-0002-5820-7480

    Biomédica com mestrado em Bioquímica pela UERJ, doutorado e Pós-doutorado em Bioquímica pelo Instituto Oswaldo Cruz.

    Nathalia N. M. Vidal

    FIOCRUZ, Departamento de Química de Produtos Naturais, Farmanguinhos, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.

    Nathalia M. N. Vidal

    FIOCRUZ, Departamento de Química de Produtos Naturais, Farmanguinhos, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.

    Rayane N. Gonçalves

    FIOCRUZ, Departamento de Química de Produtos Naturais, Farmanguinhos, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.

    Rayane N. Gonçalves

    FIOCRUZ, Departamento de Química de Produtos Naturais, Farmanguinhos, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.

Palavras-chave

Mucuna pruriens. Proteases. Atividade enzimática. Estabilidade.

Resumo

Mucuna pruriens (L.) DC é uma planta medicinal, da família Fabaceae, usada no tratamento de diversas doenças. Extratos aquosos de folhas e sementes de M. pruriens foram preparados utilizando água, detergente Triton X-100 e tampões fosfato de sódio e Tris-HCl. Os extratos de folha exibiram os maiores teores de proteínas. Todos os extratos exibiram atividade sobre o substrato N-α-p-tosil-L-arginil-metil éster (L-TAME), principalmente nas faixas de pH ácido (4,0-5,0) e alcalino (9,0- 9,5), e atividade máxima nas temperaturas entre 40-60ºC, com exceção do extrato de semente obtido com tampão Tris-HCl (MP-ST), que apresentou pico em 80ºC. Os extratos de folhas exibiram perfis eletroforéticos semelhantes sob condições redutoras e não redutoras, sendo observada uma proteína majoritária com de cerca de 30 kDa. Na análise capacidade proteolítica, o zimograma apresentou um perfil distinto em diferentes valores de pH: em pH 9,0 os extratos obtidos com água (MP-EA) e com detergente (MP-ED) apresentaram atividade na região próxima de 170 kDa; em pH 9,5 pôde-se observar duas regiões de proteólise entre 66-90 e 200-250 kDa, com exceção do MP-EA. Os extratos de semente apresentaram perfis distintos em condições redutoras e não redutoras, com proteínas majoritárias entre 35 e 23 kDa, e atividade lítica sobre a gelatina na região de 80 kDa. Todos os extratos apresentaram atividade proteolítica contra os substratos proteicos hemoglobina, caseína e albumina e boa estabilidade na presença de agentes surfactantes e oxidantes. As proteases presentes nos extratos de M. pruriens sugerem ser da classe das serino e metaloproteases, com atividade modulada positivamente na presença íons Mn2+ e Ca2+. Essas características bioquímicas conferem aos extratos de M. Pruriens grande valor biotecnológico e possível potencial terapêutico.

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  • Raquel Elisa Silva-López
    FIOCRUZ, Departamento de Química de Produtos Naturais, Farmanguinhos, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
    http://orcid.org/0000-0002-5820-7480
  • Nathalia N. M. Vidal
    FIOCRUZ, Departamento de Química de Produtos Naturais, Farmanguinhos, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
  • Nathalia M. N. Vidal
    FIOCRUZ, Departamento de Química de Produtos Naturais, Farmanguinhos, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
  • Rayane N. Gonçalves
    FIOCRUZ, Departamento de Química de Produtos Naturais, Farmanguinhos, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
  • Rayane N. Gonçalves
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1.
Perfil proteolítico de extratos aquosos de folha e semente de Mucuna pruriens (L.) DC. Rev Fitos [Internet]. 23º de maio de 2017 [citado 14º de novembro de 2024];10(4):486-504. Disponível em: https://revistafitos.far.fiocruz.br/index.php/revista-fitos/article/view/339
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