Avaliação da validação da metodologia CCD-densitometria aplicada a uma matriz complexa

Andrea Bezerra da Nóbrega
Bruno da Motta Lessa
Carlos Henrique Brasil Bizarri
Wagner Wollinger
Claudio Cerqueira Lopes
Rosangela Sabbatini Capella Lopes
Selma Ribeiro Paiva
Glaucia Barbosa Candido Alves Slana

    Andrea Bezerra da Nóbrega

    1. Fundação Oswaldo Cruz – Fiocruz, Instituto de Tecnologia em Fármacos - Farmanguinhos, Plataforma Agroecológica de Fitomedicamentos - PAF, Laboratório de Química da Biodiversidade, Avenida Comandante Guaranys, 447, Jacarepaguá, CEP 22775-903, Rio de Janeiro, RJ, Brasil. 2. 2Universidade Federal Fluminense, Faculdade de Farmácia, Pós-Graduação e Ciências Aplicadas a Produtos para Saúde, Rua Mário Viana, 523, Santa Rosa, Cep: 24.241-000, Niterói, RJ, Brasil.

    Graduada em Farmácia pela Universidade Estácio de Sá (2005) e em Química pela Faculdade de Humanidades Pedro II (1992). Mestrado e Doutorado em Ciências Aplicadas à Produtos para Saúde pela Universidade Federal Fluminense (2012 e 2017). Pós Doutoranda em Inovação Farmacêutica pela Universidade Federal de Goiás. Atualmente é Tecnologista em Saúde Pública em Farmanguinhos, Fiocruz, no Núcleo de Gestão em Biodiversidade e Saúde (NGBS) e atua como Coordenadora da Plataforma Agroecológica de Fitomedicamentos e do Setor de Desenvolvimento Tecnológico e Inovação. Tem vasta experiência na área de Desenvolvimento de Tecnologia Farmacêutica, atuando atualmente no desenvolvimento de formulações farmacêuticas a partir de espécies vegetais.

    Bruno da Motta Lessa

    1. Fundação Oswaldo Cruz – Fiocruz, Instituto de Tecnologia em Fármacos - Farmanguinhos, Plataforma Agroecológica de Fitomedicamentos - PAF, Laboratório de Química da Biodiversidade, Avenida Comandante Guaranys, 447, Jacarepaguá, CEP 22775-903, Rio de Janeiro, RJ, Brasil

    Ensino Médio (2º grau) pelo Centro Federal de Educação Tecnológica de Química de Nilópolis-CEFETEQ/RJ, Brasil. Atualmente é técnico de pesquisa da Fundação Oswaldo Cruz. Tem experiência na área de Química, com ênfase em Instrumentação Analítica, atuando principalmente nos seguintes temas: instrumentação analítica, cromatografia líquida, gasosa, HPTLC além de espectrometria de massas.

    Carlos Henrique Brasil Bizarri

    1Fundação Oswaldo Cruz – Fiocruz, Instituto de Tecnologia em Fármacos - Farmanguinhos, Plataforma Agroecológica de Fitomedicamentos - PAF, Laboratório de Química da Biodiversidade, Avenida Comandante Guaranys, 447, Jacarepaguá, CEP 22775-903, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.

    Possuo graduação em Farmácia pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (1991), especialização em Farmácia Industrial pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (1992) e mestrado em Química Orgânica pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (1998). Tenho extensa experiência na área Química Orgânica Analítica, com ênfase em Metrologia Química, atuando desde a gestão de projetos como também o desenvolvimento e validação de métodos analíticos nas áreas de alimentos, farmácia, fitoquímica, fitoterápicos, meio ambiente, química e de petróleo, empregando as técnicas de cromatografia em fase líquida e gasosa, espectrometria de massas, espectrofotometria em UV/VIS, espectrofotometria no Infravermelho (FT-IR) e análises físico-químicas. Gestão de pessoas, financeira, investimentos, orçamentária e da qualidade (BPL, NBR ISO 17025, Auditor). Consultoria técnica (implantação de novos métodos em laboratórios, suporte técnico) e auditoria de segunda parte da NBR ISO 17025. Experiência no atendimento de normas, regulamentações e legislações brasileiras (ANVISA, MAPA, INMETRO, Farmacopéia) e internacionais (ICH, AOAC, USP) para o desenvolvimento de metodologias analíticas, estudos de estabilidade, limites regulatórios de concentração, entre outros.

    Wagner Wollinger

    3. Instituto Nacional de Metrologia - INMETRO, Qualidade e Tecnologia, Divisão de Metrologia Química - DIMCI. Avenida Nossa Senhora das Graças, 50, Xerém, CEP 25250-020, Duque de Caxias, RJ, Brasil.

    Graduação em Farmácia Industrial pela Universidade Federal do Paraná (2002), mestrado em Química Analítica pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (2008) e doutorado em Química pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (2018). Pesquisador da área de Metrologia Química do Inmetro. Experiência na área de Química Analítica, com ênfase em ressonância magnética nuclear e análises cromatográficas de compostos orgânicos. Trabalha com produção de materiais de referência certificados para substâncias químicas, ensaios de produtos com foco em avaliação da conformidade e pesquisa de métodos analíticos.

    Claudio Cerqueira Lopes

    4. Universidade Federal do Rio de Janeiro, Instituto de Química. Av. Athos da Silveira Ramos 149, CT, Bloco A, sala 508, Cidade Universitária, CEP 21941-909, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.

    Cláudio Cerqueira Lopes, Universidade Federal do Rio de Janeiro-Instituto de Química, Coordenador do Laboratório de Síntese e Análise de Produtos Estratégicos (LASAPE). Possui graduação em Farmácia (1977) e Farmácia Industrial (1978), todos pela Faculdade de Farmácia- UFRJ, mestrado- IPPN, (1983) e doutorado- Instituto de Química (1989), todos em Química de Produtos Naturais e Química pela UFRJ, pós-doutorado em Síntese Orgânica no Department of Chemistry, University of California Berkeley- EUA (1989-1991). Atualmente é Professor Titular da UFRJ, iniciando a carreira docente como professor auxiliar em 1979. Tem experiência na área de Química Forense, Orgânica e Analítica, atuando principalmente nos seguintes temas: síntese de produtos naturais, produtos com aplicações na área forense, como por exemplo: tinta invisível, marcadores químicos de munições de armas de fogo resultando em projetos de lei no Senado Federal, Câmara dos Deputados e Assembléia dos Deputados do RJ, desenvolvimento de um kit para detecção de sêmen em cenas de crime de estupro, preparação de produtos estratégicos com potencial exploração econômica, tais como: amino-açucares (MIGLUSTAT), Luminol para detecção de sangue oculto em cenas de homicídio e para combater a contaminação hospitalar, análogos do PAF, LYSO-PAF preparados a partir de lecitinas de soja, biocidas com potencial aplicação para combater o processo de bioincrustação marinha e no tratamento de águas de lastro de embarcações, AltissimacumarinaD e outras substâncias com relevantes atividades biológicas. Desenvolvimento analítico na área de química forense, preparação e formulação do reagente Luminol- UFRJ empregado pela Polícia Civil do Estado do Rio de Janeiro e a Perícia Forense do Estado do Ceará- Secretaria de Segurança Pública e Defesa Social. Possui 20 patentes no Brasil e EUA, depositadas, obteve a concessão de quatro, sendo uma responsável por gerar recursos financeiros à UFRJ, através da FUJB- UFRJ, obteve 79 publicações científicas, tecnológicas e 461 citações, Web of Science ResearchID, P-1252-2018; Bolsista de Produtividade em Desenvolvimento Tecnológico e Extensão Inovadora, nível II do CNPq, índice h=11,0. Cientista do Nosso Estado- FAPERJ(2018), Medalha Maria da Penha M. Jacobina, IQ- UFRJ (2017), Membro Titular da Academia Brasileira de Medicina Militar (2014), Prêmio Petrobras de Tecnologia na 6ª edição (2013), Prêmio Amigo da Marinha do Brasil (2011), Amigo da Caserna, Comando Militar do Leste 1a Divisão de Exército (2010), Citação da síntese do Miglustat no 14th Edition of The Índex Merck, US (2009); Prêmio ABIQUIM de Tecnologia (2008); Homenagem em prol das Ciências Forenses-CREMERJ (2008); citação da importância do LUMINOL na investigação criminal no Livro Química 2, Ricardo Feltre para o ensino médio (2008), citação de trabalho em função de 100.000 acessos on line no Livro Comemorativo do Beilstein Journal of Organic Chemistry (2007), Prêmio Amigo da Polícia Civil do Estado do Rio de Janeiro- SSP/RJ(2005).

    Rosangela Sabbatini Capella Lopes

    4. Universidade Federal do Rio de Janeiro, Instituto de Química. Av. Athos da Silveira Ramos 149, CT, Bloco A, sala 508, Cidade Universitária, CEP 21941-909, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.

    Possui graduação em Farmácia pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (1977), mestrado em Química de Produtos Naturais pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (1983), doutorado em Química Orgânica pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (1989) e pós-doutorado pela UC Berkeley- EUA (1989-1991). Atualmente é Professora Titular da Universidade Federal do Rio de Janeiro, Instituto de Química- Departamento de Química Analítica. Coordenadora do Laboratório de Síntese e Análise de Produtos Estratégicos (LASAPE), IQ- UFRJ. Tem experiência na área de Química, com ênfase em Síntese Orgânica e Desenvolvimento Analítico, atuando principalmente nos seguintes temas: síntese de biocidas naturais a partir de resíduos da indústria de óleos comestíveis e biodiesel, as lecitinas de soja e glicerina, com potencial uso no tratamento de água de lastro de embarcações, visando impedir a disseminação de espécies invasoras no meio ambiente marinho brasileiro e incorporados a tintas anti-incrustantes com potencial uso de impedir o processo natural de bioincrustação em superfícies metálicas. Na área de desenvolvimento analítico atua no desenvolveu de um Kit luminol com dois borrifadores e outro associado a um luminometro portátil, para detecção de traços de sangue oculto em locais de homicídio. O reagente Luminol- UFRJ está sendo utilizado nas atividades de perícia criminal da Divisão de Homicídios (DH), Instituto de Criminalística Carlos Eboli (ICCE) da Polícia Civil do Estado do Rio de Janeiro e pela Perícia Forense do Ceará- Departamento Técnico-Científico da Polícia Judiciária do Estado do Ceará. Atualmente esta desenvolvendo a síntese da wedelolactona, um cumestano com potente atividade anti-ofídica e antitumoral. Os seus 42 trabalhos publicados e 20 patentes depositadas, as quais 4 foram concedidas no Instituto Nacional da Propriedade Industrial (INPI) e United States Patent Office (USPTO), este conjunto da produção científica e tecnológica obteve um total de 393 citações, fornecendo um índice h de 11.0, segundo o Web of Science. Pesquisadora bolsista de Desenvolvimento Tecnológico e Extensão Inovadora nivel II do CNPq.

    Selma Ribeiro Paiva

    2. Universidade Federal Fluminense, Faculdade de Farmácia, Pós-Graduação e Ciências Aplicadas a Produtos para Saúde, Rua Mário Viana, 523, Santa Rosa, Cep: 24.241-000, Niterói, RJ, Brasil. 5. Universidade Federal Fluminense - UFF, Centro de Estudos Gerais, Instituto de Biologia, Outeiro de São João Batista, s/n, Centro, CEP 24020-150, Niteroi, RJ, Brasil.

    Possui graduação em Ciências Biológicas pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (1996), mestrado em Ciências Biológicas (Botânica) pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (1999) e doutorado em Biotecnologia Vegetal pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (2003). Atualmente é professora associada da Departamento de Biologia Geral, Instituto de Biologia, Universidade Federal Fluminense e vice-coordenadora do Programa de Pós-Graduação em Ciências Aplicadas a Produtos para a Saúde (UFF). Tem experiência na área de Botânica, atuando principalmente nos seguintes temas: fitoquímica, farmacobotânica e ecologia química.

    Glaucia Barbosa Candido Alves Slana

    6. Instituto Nacional da Propriedade Industrial - INPI, Rua São Bento, 1, Centro, CEP 20090-010, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.

    Possui graduação em Farmácia pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (1995), mestrado em Química pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (1998) doutorado sanduíche em Química Medicinal pela Universidade Federal do Rio de Janeiro (2003) e Queen`s University (Canadá) e Pos-Doc em Química Inorgânica pela Pontifícia Universidade Católica. Atualmente leciona e realiza pesquisas na Universidade Federal do Rio de Janeiro e no Instituto de Tecnologia em Fármacos - Farmanguinhos/FIOCRUZ. Tem experiência na área de Química com ênfase em Química Analítica no desenvolvimento e validação de métodos analíticos plicados ao desenvolvimento e analise de medicamentos e correlatos e síntese de farmacos de origem natural via reações de litiacões. As experiências agregadas contribuíram para sua experiência em Farmacometria direcionada ao desenvolvimento de medicamentos pelo desenvolvimento de métodos in-vitro para a determinação de sua eficácia e segurança . Acumulou conhecimentos em Equivalência Farmacêutica enquanto coordenadora e responsável técnico pelo EQFAR 40, em deontologia farmacêutica, garantia da qualidade e controle de qualidade. Na área de gestão, atuou na implementação e elaboração do curso de tecnólogo em fármacos na UEZO, e estruturação dos laboratórios e cursos de Análise Farmacêutica e Controle de Qualidade da Farmácia UFRJ-Macaé. Atualmente desenvolve trabalhos no desenvolvimento e avaliação de medicamentos para tuberculose e antirretrovirais, avaliacao da biodisponibilidade e a influência dos parametros biofarmaceuticos, bem como no desenvolvimento de fitomedicamentos. Além de atuar como pesquisador em propriedade industrial. Possui orientações de alunos de IC, mestrados e doutorado nas áreas em que atua e supervisão em alunos de Pós-doutorados.


Palavras-chave

CCD / densitometria
Cromatografia em fase gasosa
Validação
Extrato natural
Ácido betulínico
Controle de qualidade

Resumo

Considerando a necessidade de um método rápido, barato e poderoso para a rotina de controle de qualidade, a Densitometria / Cromatografia de Camada Delgada foi um método escolhido para atender a essas solicitações. No entanto, essa técnica tem suas limitações quando usada para ensaios de determinação de substâncias em matrizes complexas, como extratos vegetais. Considerando a restrição da técnica cromatográfica durante o desenvolvimento de metodologias analíticas para medicamentos, foi desenvolvido um novo procedimento para superar a dificuldade em obter os parâmetros de validação dentro dos critérios internacionais de aceitação, principalmente os parâmetros de seletividade e repetibilidade. O método desenvolvido foi aplicado na quantificação de ácido betulínico (BA) a partir de extratos de produtos naturais. Todas as separações foram obtidas nas cromatoplacas Si60 F254 com n-hexano: acetato de etila: ácido acético (7: 3: 0,3) a 560 nm, após derivatização com reagente vanilina-sulfúrica. O sistema forneceu pontos compactos para BA (Rf. 0,5) e exibiu linearidade (R2 = 0,999). A metodologia foi comparada com uma metodologia de cromatografia gasosa validada e nenhuma diferença estatística foi observada.

Referências

  1. Galgon T, Höke D, Dräger B. Identification and Quantification of Betulinic Acid. Phytochem Analysis. 1999; 10: 187-190. ISSN 1099-1565. [CrossRef].
  2. Frighetto N, Welendorf RM, Silva AMP, Nakamura MJ, Siani AC. Aplicação de cromatografia centrífuga de contra-corrente na purificação de ácido ursólico das folhas de Eugenia brasilensis Lam. Rev Bras Farmacogn. 2005; 15(4): 338-343. ISSN 1981-528X. [CrossRef].
  3. Takeoka G, Dao L, Teranishi R, Wong R, Flessa S, Harden L, Edwards R. Identification of Three Triterpenoids in Almond Hulls. J Agric Food Chem. 2000; 48(8): 3437-3439. ISSN 1520-5118. [CrossRef] [PubMed].
  4. Khan I, Sangwan PL, Dhar JK, Koul S. Simultaneous quantification of five marker compounds of Betula utilis stem bark using a validated high-performance thin-layer chromatography method. J Sep Sci. 2012; 35(3): 392-399. ISSN 1615-9314. [CrossRef] [PubMed].
  5. Kaale E, Risha P, Layloff T. TLC for pharmaceutical analysis in resource limited countries. J Chromatog A. 2011; 1218(19): 2732-2736. ISSN 0021-9673. [CrossRef] [PubMed].
  6. Renger B, Végh Z, Ferenczi-Fodor K. Validation of thin layer and high performance thin layer chromatographic methods. J Chromatog A. 2011; 1218(19): 2712-2721. ISSN 0021-9673.[CrossRef].
  7. Kashmir BP, Suman KI, Gunvant KY, Mamta BS. Development and Validation of HPTLC Method for Determination of Betulinic Acid in Helicteres isora root Extract. J Chem Tech. 2010; 2: 851-855. [Link].
  8. Ferenczi-Fodor K, Renger B, Végh Z. The frustrated reviewer – Recurrent failures in manuscripts describing validation of quantitative TLC/HPTLC procedures for analysis of pharmaceuticals. J Planar Chromatog. 2010; 23(3): 173-179. ISSN 1789-0993. [CrossRef].
  9. Oprean R, Tamas M, Roman L. Comparison of GC-MS and TLC techniques for asarone isomers determination. J Pharmaceut Biomed Anal. 1998; 18: 227-234. ISSN 0731-7085. [CrossRef] [PubMed].
  10. Akowuah GA, Zhari I, Norhayati I, Mariam A. HPLC and HPTLC densitometric determination of andrographolides and antioxidant potencial of Andrographis paniculata. J Food Compost Anal. 2006; 19: 118-126. ISSN 0889-1575. [CrossRef].
  11. Andrade JM, Estévez-Pérez MG. Statistical comparison of the slopes of two regression lines: A tutorial. Anal Chim. Acta. 2014; 838: 1-12. ISSN 0003-2670. [CrossRef].
  12. Cochran WG. The distribution of the largest of a set of estimated variances as a fraction of their total. Annals Eug. 1941; 11(1): 47-52. [CrossRef].
  13. Signab ANB, El-Beshbishy HA, Yonekawa M, Nomura T, Fukai T. Hypoglycemic effect of Egyptian Morus alba root bark extract: effect on diabetes and lipid peroxidation of streptozotocin-induced diabetic rats. J Ethnopharm. 2005; 100(3): 333-338. ISSN 0378-8741. [CrossRef] [PubMed].
  14. David JM, Souza JC, Guedes MLS, David JP. Estudo fitoquímico de Davilla rugosa: flavonoides e terpenóides. Rev Bras Farmacogn. 2006; 16(1): 105-108. ISSN 1981-528X. [CrossRef].
  15. Kumar D, Mallick S, Vedasiromoni JR, Pal BC. Anti-leukemic activity of Dillenia indica L. fruit extract and quantification of betulinic acid by HPLC. Phytomedicine. 2010; 17(6): 431-435. ISSN 0944-7113. [CrossRef].
  16. Castilho RO, Oliveira RR, Kaplan MAC. Licanolide, a new triterpene lactone from Licania tomentosa. Fitoterapia. 2005; 76: 562-566. ISSN 0367-326X. [CrossRef] [PubMed].
  17. Castilho RO, Kaplan MAC. Constituintes químicos de Licania tomentosa Benth. (Chrysobalanaceae). Quim Nova. 2008; 31(1): 66-69. ISSN 0100-4042. [CrossRef].
  18. Mukherjee PK, Pal M, Pal SK, Saha K, Saha BP. Pharmacognostical profiles of rhizomes of Nelumbo nucifera Gaenth. Anc Sci Life. 1998; 17(4): 273-279. [PubMed].
  19. Frighetto N, Welendorf RM, Silva AMP, Nakamura MJ, Siani AC. Purification of betulinic acid from Eugenia florida (Myrtaceae) by high-speed counter-current chromatography. Phytochem Anal. 2005; 16(6): 441-444. ISSN 0958-0344. [CrossRef] [PubMed].
  20. Baltina LA, Flakhter OB, Nigmatullina LR, Boreko EI, Pavlova NI, Nikoleave SN et al. Lupane triterpenes and derivatives with antiviral activity. Bioorg Med Chem Lett. 2003; 3: 3549-3552. ISSN 0960-894X. [CrossRef] [PubMed].
  21. Sami A, Taru M, Salme K, Jari Y-K. Pharmacological properties of the ubiquitous natural product betulin. Eur J Pharmac Sci. 2006; 29: 1-13. ISSN 1879-0720. [CrossRef]. [PubMed].
  22. Aguirre MC, Delporte C, Backhouse N, Erazo S, Letelier ME, Cassels BK et al. Topical anti-inflammatory activity of 2alpha-hydroxy pentacyclic triterpene acids from the leaves of Ugni molinae. Bioorgan Med Chem. 2006; 14(16): 5673-5677. ISSN 0968-0896. [CrossRef] [PubMed].
  23. Mukherjee PK, Saha K, Das J, Pal M, Saha BP. Studies on the AntiInflamatory Activity of Rhizomes of Nelumbo nucifera. Plan Med. 1997; 63(4): 367-369. ISSN 1439-0221. [CossRef] [PubMed].
  24. Schmidt ML, Kuzmanoff KL, Ling-Indeck L, Pezzuto JM. Betulinic acid induces apoptosis in human neuroblastoma cell lines. Europ J Cancer. 1997; 33(12): 2007-2010. ISSN 1879-0852. [CrossRef] [PubMed].
  25. Pisha E, Chai H, Lee I, Chagwedera TE, Farnsworth NR, Cordell GA et al. Discovery of betulinic acid as a selective inhibitor of human melanoma that functions by induction of apoptosis. Nat Med. 1995; 1: 1046-1051. ISSN 1546-170X. [CrossRef] [PubMed].
  26. Fulda S, Jeremias I, Sieiner HH, Pietsch T, Debatin KM. Betulinic acid: A new cytotoxic agent against malignant brain-tumor cells. Int J Cancer. 1999; 82: 435-441. ISSN1097-0215. [CrossRef] [PubMed].
  27. Ehrhardt H, Fulda S, Fuhrer M, Debatin KM, Jeremias I. Betulinic acid-induced apoptosis in leukemia cells. Leukemia. 2004; 18: 1406-1412. ISSN 1476-5551. [CrossRef] [PubMed].
  28. Mukherjee D, Kumar NS, Khatua T, Mukherjee PK. Rapid validated HPTLC method for estimation of betulinic acid in Nelumbo nucifera (Nymphaeaceae) rhizome extract. Phytochem Anal. 2010; 21: 556-560. ISSN 1099-1565. [CrossRef] [PubMed].
  29. ICH-Q2(R1). Validation of Analytical Procedures: Methodology International Conference on Harmonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use. Geneva, Switzerland 2005. Disponível em: [Link].
  30. AOAC_Peer. Verified Methods Program, Manual on Policies and Procedures, Appendix D: Guidelines for Collaborative Study Procedures to Validate Characteristics of a Method of Analysis. Off Met Anal Manual. USA, 2002. Disponível em: [Link].
  31. Eurachem guide: The Fitness for Purpose of Analytical Methods - A Laboratory Guide Method Validation and Related Topics. 2nd ed. 2014. Disponível em: [Link].

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Autor(es)

  • Andrea Bezerra da Nóbrega
    1. Fundação Oswaldo Cruz – Fiocruz, Instituto de Tecnologia em Fármacos - Farmanguinhos, Plataforma Agroecológica de Fitomedicamentos - PAF, Laboratório de Química da Biodiversidade, Avenida Comandante Guaranys, 447, Jacarepaguá, CEP 22775-903, Rio de Janeiro, RJ, Brasil. 2. 2Universidade Federal Fluminense, Faculdade de Farmácia, Pós-Graduação e Ciências Aplicadas a Produtos para Saúde, Rua Mário Viana, 523, Santa Rosa, Cep: 24.241-000, Niterói, RJ, Brasil.
  • Bruno da Motta Lessa
    1. Fundação Oswaldo Cruz – Fiocruz, Instituto de Tecnologia em Fármacos - Farmanguinhos, Plataforma Agroecológica de Fitomedicamentos - PAF, Laboratório de Química da Biodiversidade, Avenida Comandante Guaranys, 447, Jacarepaguá, CEP 22775-903, Rio de Janeiro, RJ, Brasil
  • Carlos Henrique Brasil Bizarri
    1Fundação Oswaldo Cruz – Fiocruz, Instituto de Tecnologia em Fármacos - Farmanguinhos, Plataforma Agroecológica de Fitomedicamentos - PAF, Laboratório de Química da Biodiversidade, Avenida Comandante Guaranys, 447, Jacarepaguá, CEP 22775-903, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
  • Wagner Wollinger
    3. Instituto Nacional de Metrologia - INMETRO, Qualidade e Tecnologia, Divisão de Metrologia Química - DIMCI. Avenida Nossa Senhora das Graças, 50, Xerém, CEP 25250-020, Duque de Caxias, RJ, Brasil.
  • Claudio Cerqueira Lopes
    4. Universidade Federal do Rio de Janeiro, Instituto de Química. Av. Athos da Silveira Ramos 149, CT, Bloco A, sala 508, Cidade Universitária, CEP 21941-909, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
  • Rosangela Sabbatini Capella Lopes
    4. Universidade Federal do Rio de Janeiro, Instituto de Química. Av. Athos da Silveira Ramos 149, CT, Bloco A, sala 508, Cidade Universitária, CEP 21941-909, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
  • Selma Ribeiro Paiva
    2. Universidade Federal Fluminense, Faculdade de Farmácia, Pós-Graduação e Ciências Aplicadas a Produtos para Saúde, Rua Mário Viana, 523, Santa Rosa, Cep: 24.241-000, Niterói, RJ, Brasil. 5. Universidade Federal Fluminense - UFF, Centro de Estudos Gerais, Instituto de Biologia, Outeiro de São João Batista, s/n, Centro, CEP 24020-150, Niteroi, RJ, Brasil.
  • Glaucia Barbosa Candido Alves Slana
    6. Instituto Nacional da Propriedade Industrial - INPI, Rua São Bento, 1, Centro, CEP 20090-010, Rio de Janeiro, RJ, Brasil.

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Como Citar

1.
Avaliação da validação da metodologia CCD-densitometria aplicada a uma matriz complexa. Rev Fitos [Internet]. 20º de agosto de 2020 [citado 26º de dezembro de 2024];14(2):177-90. Disponível em: https://revistafitos.far.fiocruz.br/index.php/revista-fitos/article/view/998
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